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細(xì)胞學(xué)堂 | 實(shí)驗(yàn)室污染應(yīng)對攻略

在養(yǎng)細(xì)胞的過程中，實(shí)驗(yàn)室污染仍是普遍存在的問題。在這個(gè)過程中，使用的試劑、耗材、環(huán)境、操作等都有可能造成污染，如支原體污染、細(xì)菌污染等[1]。污染會影響細(xì)胞的生長和形態(tài)，甚至導(dǎo)致細(xì)胞功能、性質(zhì)發(fā)生改變，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)研究的準(zhǔn)確性。因此，對實(shí)驗(yàn)室污染進(jìn)行預(yù)防、排查與清除，是至關(guān)重要的。本期細(xì)胞學(xué)堂為您整理了一份實(shí)驗(yàn)室污染最-全應(yīng)對攻略，幫助您快速上手清除污染。01污染的預(yù)防嚴(yán)格執(zhí)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度不斷完善無菌實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度，加強(qiáng)無菌實(shí)驗(yàn)室的管理。外來進(jìn)修人員、實(shí)習(xí)學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離提取

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs）來源于中胚層，是具有多分化潛能的細(xì)胞。細(xì)胞生物學(xué)表明，BMSCs具有較強(qiáng)的增殖能力和多向分化潛能。在不同誘導(dǎo)條件下，可向中胚層細(xì)胞如脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、肌細(xì)胞等分化。BMSCs是理想的種子細(xì)胞來源之一，在細(xì)胞替代治療、基因治療及組織器官再造中具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離提取的方法、注意事項(xiàng)及鑒定指標(biāo)，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。分離提取步驟骨髓取...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 細(xì)胞培養(yǎng)中的小黑點(diǎn)，原來是它

提起細(xì)胞培養(yǎng)，相信很多老師都遇到過培養(yǎng)液中的“小黑點(diǎn)”，因無法確定它的身份而頭痛不已。本期細(xì)胞學(xué)堂將為大家揭秘這些黑點(diǎn)究竟是什么，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。01血清沉淀血清在融解過程中會產(chǎn)生大量的析出物，呈現(xiàn)出小顆粒樣的東西，甚至呈纖維樣，這是由于血清融解后導(dǎo)致的蛋白、鹽類物質(zhì)的析出。血清融解時(shí)混勻血清靜置融解不混勻，出現(xiàn)黑點(diǎn)顯微鏡下的血清沉淀物影響因素通常血清析出物的多少與融解方法有關(guān)。通過4℃冰箱解凍和溶解過程持續(xù)搖晃混勻，可以有效避免沉淀產(chǎn)生，而37℃靜置混勻則會有較多沉...

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細(xì)胞學(xué)堂 | BV2細(xì)胞形態(tài)問題大揭秘

BV2細(xì)胞系由E·Blasi于1990年建立，應(yīng)用小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染v-raf/v-myc獲得永生化，在模擬神經(jīng)系統(tǒng)疾病和研究相關(guān)疾病機(jī)制方面應(yīng)用廣泛。BV2細(xì)胞保留有小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞多種形態(tài)、表征和功能特征，免疫組化結(jié)果顯示，BV2細(xì)胞為MAC1、MAC2陽性，MAC3、膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂陰性。培養(yǎng)BV2細(xì)胞時(shí)，最常遇到的問題就是細(xì)胞形態(tài)異常，通常伴隨著細(xì)胞形狀改變、拉絲較多等，對大家的實(shí)驗(yàn)造成影響。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了BV2細(xì)胞的培...

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細(xì)胞凋亡的幾種檢測方法

細(xì)胞凋亡的幾種檢測方法：一形態(tài)學(xué)觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細(xì)胞呈圓形，胞核深染，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)成團(tuán)塊狀，細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙（AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細(xì)胞核呈黃綠色熒光，胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè)，可見細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍(lán)染色：如果細(xì)胞膜不完整、破裂，臺盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞變藍(lán)，即為壞死。如果細(xì)胞膜完整，細(xì)胞不為臺盼藍(lán)染色，則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對反映細(xì)胞膜的完整性，區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫...

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疑難解析 | 2023年度直播答疑熱點(diǎn)匯總

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，我們通常會遇到各種各樣的問題，這些問題一般是多種因素造成的，如細(xì)胞密度、培養(yǎng)環(huán)境、操作方法等。2023年，普諾賽圍繞細(xì)胞培養(yǎng)問題，共舉辦了10場線上直播，吸引了萬余人觀看。直播期間，大家踴躍發(fā)言，提出了日常實(shí)驗(yàn)中遇到的問題。本期直播答疑篩選出部分問題做了詳細(xì)解答。牙源性干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清會誘導(dǎo)分化嗎？血清成份復(fù)雜，里面包含抑制分化的因子，也包含促進(jìn)分化的因子；間充質(zhì)干細(xì)胞一類成體干細(xì)胞大多可以用血清培養(yǎng)，單能干細(xì)胞，用血清不會分化；胚胎干會細(xì)胞分化。血清的刺激...

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直播答疑 | 細(xì)胞培養(yǎng)答疑專場

12月14日的直播中，普諾賽直播間為大家介紹了細(xì)胞黑點(diǎn)、細(xì)胞狀態(tài)變形、細(xì)胞空泡、聚團(tuán)、脫落等常見問題，直播回放請至B站-“普諾賽生物”進(jìn)行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細(xì)解答。如有其他問題，也歡迎大家在公眾號留言，我們將在線解答。消化時(shí)間過長會損傷細(xì)胞嗎？消化時(shí)間過長會導(dǎo)致細(xì)胞膜蛋白的改變，最直觀的表現(xiàn)就是消化后第二天漂浮細(xì)胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化對細(xì)胞損傷小還是機(jī)械吹打?qū)?xì)胞損傷??？建議二次消化。細(xì)胞與細(xì)胞間的連接沒有...

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細(xì)胞學(xué)堂 | A-498細(xì)胞知識盤點(diǎn)

A-498（人腎癌細(xì)胞）細(xì)胞由Aaronson·S建立，是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態(tài)的細(xì)胞系。該細(xì)胞系是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主，在腫瘤研究中具有一定的應(yīng)用價(jià)值，常作為腎細(xì)胞癌研究的模型。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了A-498細(xì)胞的培養(yǎng)條件與傳代、凍存步驟及常見應(yīng)用，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞形態(tài)A498細(xì)胞貼壁生長，呈上皮樣形態(tài)，細(xì)胞鋪開面積大，單位面積細(xì)胞總數(shù)量少，少量細(xì)胞有觸角；低密度時(shí)可觀察到單個(gè)細(xì)胞清晰的邊緣，密度大于100%時(shí)邊緣不清晰，細(xì)胞與...

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